中华人民共和国国家标准职业性苯中毒诊断标准及处理原则-法搜-中国法律信息搜索网

平均值。此白细胞悬浮液供酶活性测定之用。如不能立即测定，需放置冰箱内，
但必须在当天测定。
　　Ｃ．３．２　白细胞碱酶活性的测定
　　取一小试管，加入β—甘油磷酸钠０．８５ｍｌ，皂素０．０５ｍｌ，
氯化镁０．０２ｍｌ，于３７℃水浴中预热５分钟，然后准确加入白细胞悬浮液０．０５ｍｌ，混匀，继续保温６０分钟，到时立即加入５０％三氯乙酸０．１５
ｍｌ使反应终止，以２５００转／分离心１０分钟，除去沉淀。
　　每个样品都需作对照管测定，对照管所加内容物同上，仅白细胞悬浮液须在保温后加５０％三氯乙酸后加入。
　　分别取样品和对照管上清液０．８０ｍｌ，各加入钼酸铵试剂０．１５ｍｌ，氨基萘酚磺酸溶液０．１０ｍｌ，重蒸馏水１．４５ｍｌ，显色２０分钟，用分光光度计测定光密度（所用波长为６６０ｎｍ、比色杯厚１０ｍｍ），分别读取样品管、对照管的光密度。每管重复读数两次，取其平均值。
　　Ｃ．３．３　磷标准曲线的制定
　　取标准磷储备液，用５％三氯乙酸稀释成不同浓度的标准磷应用液，浓度分别为：１．０，３．０，５．０，７．５，１０．０ｍｇ／１。然后取试管５支，分别在每一试管加入１．０ｍｌ上述标准磷应用液之一种，以及钼酸铵０．１５
ｍｌ，氨基萘酚磺酸０．１０ｍｌ，重蒸馏水１．２５ｍｌ，按上法显色，读取
各管的光密度，绘制标准曲线图。
　　Ｃ．３．４　白细胞分类计数
　　在取血分离白细胞的同时，取１滴血作涂片，瑞氏染色，按常规分类计数嗜中性白细胞的百分比。
　　Ｃ．３．５　计算方法
　　白细胞碱酶活性用单位表示，以每十亿个中性白细胞在３７℃条件下，１小时释放出１ｍｇ无机磷为一个单位。计算公式如下：
　　　酶活性（单位）＝｛〔ｐｉ（样）—ｐｉ（对）〕×１００００×１．４０｝÷（Ｗ·Ｖ·Ｎ）
式中：ｐｉ（样）——样品管无机磷，μｇ；
　　　ｐｉ（对）——对照管无机磷，μｇ；
　　　　　　　Ｗ——白细胞悬液的白细胞数，个／立方毫米；
　　　　　　　Ｖ——酶反应所加入白细胞悬液的量，ｍｌ；
　　　　　　　Ｎ——嗜中性白细胞，％。
　　注：为减少操作误差，提高结果准确性，也可自静脉采血１．５ｍｌ，按常量法进行操作。详见《卫生研究》５（６）：４８１，１９７６。
　　Ｃ．４　注意事项
　　ａ．白细胞悬液必须充分摇匀，不应有聚集的细胞。白细胞计数要准确，一般应计数２～４次，取平均值。